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复杂细胞内表型的流式高通量CRISPR 基因编辑筛选

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简介： CRISPR-Cas9 基因编辑技术的发展推动了新一代生命科学应用的诞生¹。在药物研发领域，研究人员利用 CRISPR 精确的基因敲除能力，实现了全基因组范围的药物筛选。通过建立基因型与表型之间的关联，基于 CRISPR 的表型筛选可以更深入地理解药物作用机制（MOA），并识别新的可成药靶点。 然而，目前的表型 CRISPR 筛选方法主要依赖显微成像 来识别目标表型，这一过程存在通量限制，只能基于二元荧光信号筛选少量简单表型。 为了充分发挥基于 CRISPR 的表型筛选潜力，我们展示了 VisionSort 平台在高通量、无标记的 CRISPR 筛选方法中的应用，该方法可针对细胞形态表型进行筛选。作为概念验证，我们利用该方法筛选了参与巨噬细胞极化调控的基因。 总结： ・CRISPR-Cas9 技术可实现全基因组药物筛选，帮助理解药物作用机制并发现新靶点。 ・现有表型 CRISPR 筛选高度依赖显微成像，通量有限，仅能筛选少量简单表型。 ・VisionSort 平台可实现高通量、无标记的细胞形态表型筛选，并用于识别调控巨噬细胞极化的基因。


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